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糖化血红蛋白与血糖的区别是什么 糖化血红蛋白的检测方法是什么

实验室资讯网时间:2018-08-15 点击: 百度搜索

【导读】血糖是从食物中的碳水化合物分解而来的血液中的单糖,通常仅指葡萄糖。血糖测试结果反映的是即刻的血糖水平。糖化血红蛋白测试通常可以反映患者近8~12周的血糖控制情况。   糖化血红蛋白是糖尿病诊断新标准和治疗监测的"金标准" 随着人们对糖尿病知识的逐步了解,多数人已意识到空腹和餐后2小......
TAG标签: 糖化血红蛋白 HbA1c 血糖 检测方法

一、糖化血红蛋白与血糖的区别是什么

血糖是从食物中的碳水化合物分解而来的血液中的单糖,通常仅指葡萄糖。血糖测试结果反映的是即刻的血糖水平。糖化血红蛋白测试通常可以反映患者近8~12周的血糖控制情况。
  糖化血红蛋白是糖尿病诊断新标准和治疗监测的"金标准" 随着人们对糖尿病知识的逐步了解,多数人已意识到空腹和餐后2小时血糖监测的重要性,并常常把二者的测定值作为控制血糖的标准。
  其实不然,空腹和餐后2小时血糖是诊断糖尿病的标准,而衡量糖尿病控制水平的标准是糖化血红蛋白。空腹血糖和餐后血糖是反映某一具体时间的血糖水平,容易受到进食和糖代谢等相关因素的影响。
  糖化血红蛋白可以稳定可靠地反映出检测前120天内的平均血糖水平,且受抽血时间,是否空腹,是否使用胰岛素等因素干扰不大。因此,国际糖尿病联盟推出了新版的亚太糖尿病防治指南,明确规定糖化血红蛋白是国际公认的糖尿病监控"金标准"。如果空腹血糖或餐后血糖控制不好,糖化血红蛋白就不可能达标。

二、糖化血红蛋白的检测方法是什么

  1、电泳法
  原理:相比于非糖化血红蛋白,因糖化而变化的总电荷和糖化血红蛋白的等电点变化是琼脂糖凝胶或者pH梯度5.0~6.5的凝胶等电聚焦电泳分离的基础。琼脂糖凝胶电泳的血红蛋白亚组分分辨率很小,而等电聚焦可以更好地使亚组分分离。可能由于试验的自动化程度不足,重要性已经下降。
  2、亲和层析法
  原理:硼酸结合顺式-羟基。商品化的m-氨基苯硼酸琼脂糖共价结合的亲和柱已可用于微柱分析检测。将血样本中的血红蛋白加到层析柱后,所有的糖化血红蛋白(HbA1和旁链糖化的血红蛋白;总糖化血红蛋白)与硼酸结合而非糖化血红蛋白通过层析柱可被测量。在加入高浓度也包含顺式-羟基的多羟基复合物,例如山梨醇后,糖化血红蛋白与硼酸的结合被替换而从柱子上洗脱下来。亲和层析法对经翻译以后修饰的血红蛋白和病理血红蛋白的影响相对不敏感。利用亲和层析法,仅能测定总糖化血红蛋白。广泛使用的亲和层析方法,允许用经验算法从总糖化血红蛋白值计算出"标准的HbA1c"。
  3、免疫分析法
  在缬氨酸β-N-末端糖化的血红蛋白提供了一个容易被抗体识别的抗原表位。可以用单克隆抗体或多克隆抗体进行放射免疫分析和免疫酶学分析测定,抗体特异识别β链N-末端糖化的血红蛋白最后4~8个氨基酸组成的抗原表位。异常的血红蛋白或翻译后经修饰的血红蛋白无干扰。

三、测量糖化血红蛋白的操作方案

糖化血红蛋白与血糖的区别是什么 糖化血红蛋白的检测方法是什么

1、操作方法 (1)收集静脉血、加入EDTA抗凝。(2)根据样品数取试管若干,分别吸取400μl溶血剂加入各试管中。(3)分别吸取80μl标准或样本放入上述各试管中,混合均匀。(4)放置5~10min,则制成了血红蛋白样本A3。
  2、糖化血红蛋白的制备及测定 (1)根据样品的数量,取干净的试管若干,分别吸取3.0ml阳离子树脂,放入各管中。(2)向上述试管中分别加入已预备的100μl血红蛋白样本(A3)。将层析柱插入试管中,使得橡皮塞高于液面至少1cm。(3)充分摇荡试管混合5~10min(最好使用涡旋摇荡器,如果没有则需剧烈摇荡20min。(4)然后慢慢推动层析柱进入试管,直到糖化血红蛋白提取完全。(5)上清液倒入另一支试管或直接倒入比色杯进行比色。(6)以蒸馏水作空白在415nm调零。(7)读取并记录标准,样品吸光度值。
  3、总血红蛋白测定 (1)根据样品数量取试管若干,分别加入5.0ml蒸馏水。(2)加入20μl血红蛋白样本(A3)。混合均匀。(3)以蒸馏水作空白在415nm调零。(4)读取并记录各管吸光度值。
  计算:糖化血红蛋白吸光度 总血红蛋白吸光度×10=糖化血红蛋白%(正常值范围6.0%~8%)。

四、糖化血红蛋白的监测意义是什么

糖化血红蛋白的特点决定了它在糖尿病监测中有很大的意义:

(1)与血糖值相平行。血糖越高,糖化血红蛋白就越高,所以能反映血糖控制水平。
  (2)生成缓慢。由于血糖是不断波动的,每次抽血只能反映当时的血糖水平,而糖化血红蛋白则是逐渐生成的,短暂的血糖升高不会引起糖化血红蛋白的升高;反过来,短暂的血糖降低也不会造成糖化血红蛋白的下降。由于吃饭不影响其测定,故可以在餐后进行测定。
  (3)一旦生成就不易分解。糖化血红蛋白相当稳定,不易分解,所以它虽然不能反映短期内的血糖波动,却能很好地反映较长时间的血糖控制程度,糖化血红蛋白能反映采血前2个月之内的平均血糖水平。
  (4)较少受血红蛋白水平的影响。糖化血红蛋白是指其在总血红蛋白中的比例,所以不受血红蛋白水平的影响。

(本文来源:互联网 )

(责任编辑:大林)

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